土壤全磷的测定

土壤全磷量即磷的总贮量，包括有机磷和无机磷两大类。土壤中的磷素大部分是以迟效性状态存在，因此土壤全磷含量并不能作为土壤磷素供应的指标，全磷含量高时并不意味着磷素供应充足，而全磷含量低于某一水平时，却可能意味着磷素供应不足。因此了解土壤磷总贮量，对生产实践仅有一定的参考价值。
  土壤全磷测定的待测液制备，一般分为碱熔法和酸溶法两类。在碱熔法中以Na2CO3熔融分解最为完全，准确度较高，但熔融时需要铂坩埚，不适宜用于常规分析。在酸溶法中以   H2SO4———HCLO4法较好。此法对钙质土壤分解率较高，但对酸性土壤分解不易十分完全，结果往往稍微偏低。
  待测液中磷的测定，一般都采用钼蓝比色法，所用的显色剂有“钼锑抗”（钼酸铵—酒石酸锑钾—抗坏血酸试剂的简称），氯化亚锡，抗坏血酸和1，2，4—氨基萘酚磺酸等。其中钼锑抗法有手续简便，颜色稳定，干扰离子允许量大等优点，目前国内应用较广。
1．酸溶—钼锑抗比色法：
    （1）方法要点：在高温条件下，土壤中含磷矿物和有机磷化合物与高沸点的H2SO4和强氧化剂HCLO4作用，使之完全分解，全部转化为正磷盐而进入溶液，然后用钼锑抗比色法测定。
   （2）主要仪器：分光光度计，2KVA方电炉，3KVA调压变压器。
 （3）试剂： A．浓H2SO4（二级）。 B．HCLO4（二级，70~72%）。C．钼锑贮存液。浓H2SO4（二级）153毫升缓慢倒入约400毫升水中，搅拌，冷却。10克钼酸铵（二级）溶解于约60。C的300毫升水中，冷却。然后将H2SO4溶液缓缓倒入钼酸铵溶液中，再加入100毫升0.5%酒石酸锑钾溶液，最后用水移释至1升，避光贮存。此贮存液含1%钼酸铵，5.5摩尔/升1/2H2SO4。 D．钼锑抗显色剂。1.50克抗坏血酸溶液于100毫升钼锑贮存液中。此液须随配随用，有效期一天。E．二硝基酚指示剂。0.2克2，6-二硝基酚或2，4二硝基酚溶于1000毫升水中。F．5ppmP标准溶液。0.4390克KH2PO4（二级，105。C烘过2小时）溶于200毫升水中，加入5毫升浓H2SO4，转入1升容量瓶中，用水定容。此为100ppmP标准溶液，可以长期保存。取此溶液准确稀释20倍，即为5ppmP标准溶液，此溶液不宜久存。
（4）操作步骤：A．待测液的制备：称取通过100目的烘干土壤样品1克（精确到0.0001克）置于50毫克三角瓶中，以少量水湿润，加入浓H2SO48毫升，摇动后（最好放置过夜）再加入70~72%的HCLO410滴，摇匀，再加热消煮。缓慢升温，HCLO4烟雾消失后，再提高温度，使H2SO4发烟回流，待瓶内溶液开始转白后继续消煮20分钟，全部消煮时间为45~60分钟。将冷却后的消煮液用水小心地冲入100毫升容量瓶中，冲洗时用水应量少次多，轻轻摇动容量瓶，待完全冷却后，以水定容，用干燥漏斗和无磷滤纸将溶液滤入干燥的100毫升三角瓶中。同时做空白试验。B．测定：取上述待测液2~10毫升（含5~25微克P）于50毫升容量瓶中，用水稀释至约30毫升，加二硝基酚指示剂2滴，用稀NaOH溶液和稀H2SO4溶液调节pH值至溶液刚呈微黄色。然后加入钼锑抗显色剂5毫升，摇匀，用水定容，。在室温高于15。C的条件下放置30分钟后，在分光光度计上用波长700纳米比色，以空白试验溶液为参比液调零点，读取吸假值。在工作曲线上查出显色液的Pppm数。颜色在8小时内可保持稳定。C．工作曲线的绘制：分别吸取5ppm标准溶液0，1，2，3，4，5，6毫升于50毫升容量瓶中，加水稀释至约30毫升，加入钼锑抗显色剂5毫升，摇匀，定容。即得0，0.1，0.2，0.3，0.4，0.5，0.6ppmP标准毓溶液，与待测液同时比色，读取吸收值。在方格坐标纸上以吸收值为纵坐标，Pppm数为横坐标纸上以吸收值为纵坐标，Pppm数为横坐标，绘制成工作曲线。

    2．碱熔—钼锑抗比色法
（1）方法要点：样品用Na2CO3高温熔融，使难溶性的磷酸盐及有机态磷分解成可溶性正磷酸盐，以稀H2SO4溶解熔融物，制备成待测液，用钼锑抗比色法测定。
（2）主要仪器：铂坩埚，高温电炉，分光光度计。
  （3）试剂：
    A：无水Na2CO3（二级），磨细，通过250微米（60目）。
    B：6摩尔/升1/2 H2SO4
     其余试剂同酸溶一钼锑抗比色法。
 （4）操作步骤；称取通过100目的烘干土样品0.25（精确到0.0001克）置于铂坩埚中，另外称取研细的无水Na2CO32克，将其中的1.8克小心地用平头玻璃棒与样品充分搅拌混匀，其余的铺于混合物表面，并轻轻敲动坩埚，铺平。将坩埚放入高温电炉中，升温至900~920。C熔融，20分钟后取出后趁热时揭盖观察熔块状态：倘若表面成凹形颜色均一而气泡时，则熔融已完全。取出熔块，放入100毫升高型烧杯中，盖上表面皿，小心地加入约10毫升6摩尔/升1/2H2SO4溶解熔块，并用热水洗净坩埚。将烧杯中的内溶物洗入100毫升容量瓶中，用热水及带橡皮帚玻璃棒将烧杯洗净，洗涤液均倒入上述容量瓶中，冷却后定容，用干燥漏斗及无磷滤纸过滤于三角瓶中。
吸取滤液5~10毫升（含5~25微克P）于50毫升容量瓶中加水稀释至约30毫升，用钼锑抗比色法测定磷量（同酸溶—钼锑抗比色法）。在整个操作过程中，同时作试剂空白试验。
（5）结果计算：同酸溶—钼锑抗比色法。

　
 
土壤有效磷的测定
土壤有效磷的测定是合理施用磷肥的依据之一。浸提剂的选择主要根据各种土壤性质而定。在目前使用较广的几种浸提剂中，一般认为以0.03摩尔/升NH4F—0.025摩尔/升HCL浸提剂比较适合于风化程度较高的酸性土壤；石灰性土壤通常用0.5摩尔/升NaHCO3(pH值为8.5)浸提比较满意；对于中性和酸性水稻土NH4F—HCL法和NaHCO3法都有应用。土壤有效磷含量只是一个相对的指标，同一土壤用不同方法测得的有效磷量可以相差很多，即使用同一浸提剂，由于浸提条件如土液比、温度、时间、振荡方法在相同条件下测得的结果才有相互比较的意义。也不能根据结果直接来计算施肥量。因此，在报告有效磷结果时必须同时说明所用的测定方法。
1．0.5摩尔/升NaHCO3浸提—钼锑抗比色法：
（1）方法要点：石灰性土壤中的磷主要以磷酸钙的形态存在，中性土壤中则磷酸钙盐、磷酸铝盐磷酸铁盐都占有一定的比例。0.5摩尔/升NaHCO3可以抑制Ca2+的活性，使某些活性较大的磷权钙盐中的磷被浸提出来；同时，也可使活性较强的磷酸铁、磷酸铝起水解作用而浸出。浸出液中的磷用钼锑抗比色法测定。
（2）主要仪器：往复振荡机，分光光度计。
（3）试剂：
  A．0.5摩尔/升NaHCO3(pH值为8.5)浸提剂。42.0克NaHCO3（三级）溶于约800毫升水中，稀释至约990毫升，用4摩尔/升NaOH溶液调节pH值至8.5（用pH计测定），最后稀释到1升，置于塑料瓶中，此溶液随配随用，不宜久存。
B．无磷活性炭。将活性炭粉先用1:1HCL浸泡过夜，然后在平板漏斗上抽气过滤，用水洗到无Cl-为止。再用0.5摩尔/升NaHCO3溶液浸泡过夜，在平板漏斗上抽气过滤，用水洗尽NaHCO3，最后检查到无磷为止，烘干备用。
其余试剂同全磷分析中酸溶—钼锑抗比色法。
（4）操作步骤：称取通过1毫米筛孔的风干土壤样品5.00克；置于250毫升三角瓶中，加入一小匙无磷活性炭粉和0.5摩尔/升NaHCO3浸提剂100毫升，在20~25。C振荡30分钟（振荡机速率每分钟150~180次），取出后用干燥漏斗和无磷滤纸过滤于三角瓶中，同时，做试剂空白试验。
吸取浸出液10~20毫升（含5~25微克P）于50毫升容量瓶中，加水稀释至约30毫升，加入二硝基酚指示剂2滴，用稀H2SO4和稀NaOH溶液调节pH值至溶液刚呈微黄色，等CO2充分放出后，用钼锑抗比色法测定（同全磷测定酸溶—钼锑抗比色法）。
（5）计算结果（未录）
 2．0.03摩尔/升NH4F—0.025摩尔/升HCL浸提—钼锑讥比色法：
（1方法要点：酸性土壤中的磷主要是以酸磷铁和磷酸铝的形态存在，利用F-酸性溶液中络合Fe3+和Al3+的能力，可使这类土壤中活性较强的磷酸铁、磷酸铝盐被活化释放，同时由于H+的作用，也能溶解出部分磷酸钙盐。
 (2)主要仪器：往复振荡机，分光光度计。
（3）试剂：
A．0.03摩尔/升NH4F—0.025摩尔/升HCl浸提剂。1.11NH4F（三级）溶于800毫升水中，加1.0摩尔/升HCL25毫升，然后稀释至1升，贮于塑料瓶中。
B．0.8摩尔/升H3BO3溶液：
其余试剂同全磷测定中碱熔—钼锑抗比色法。
（4）操作步骤：称取通过1毫米筛孔的风干土壤样品5.00克，置于150毫升塑料瓶中，加入0.03摩尔/升NH4F—0.025摩尔/升HCl浸提剂50毫升，在20~25。C振荡30分钟（振荡机速率为每分钟150~180次），取出后立即用干燥漏斗和无磷滤纸过滤于塑料瓶中。
吸取滤液10~20毫升（含5~25微克P）于50毫升容量瓶中，加入10毫升0.8摩尔/升H3BO3溶液，再加入二硝基酚指示剂2滴，用稀HCl和NH4OH溶液调节pH值至待测液呈微黄，用钼锑抗比色法测定磷（同全磷测定中酸溶—钼锑抗比色法），同时作空白试验。
（5）结果计算；同0.5摩尔/升NaH-CO3浸提—钼锑抗比色法。
3．两种浸提剂测得的土壤有效磷，参考指标：见表3.2-1。
表3.2—1  土壤有效磷用两种浸提剂测得的指标（P，pmm）